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讓專業(yè)人員告訴你大鼠ELISA試劑盒的樣品處理和保存方法

更新時間:2021-07-14      點擊次數(shù):1268

    大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠活性氧(ROS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠活性氧(ROS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

    大鼠ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:

    1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

    2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

    3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

    5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品:

    1.酶標儀(450nm)

    2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.37℃恒溫箱
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